公司新聞 | 經(jīng)典品讀匯 《豬病學(xué)》第11版之“豬支原體肺炎”篇(上)

時(shí)間 :2019/11/22 14:41:24點(diǎn)擊 :519編輯:集團(tuán)策劃部

概述

豬肺炎支原體(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhyo)只感染豬并且無(wú)處不在,幾乎在所有國(guó)家和養(yǎng)豬場(chǎng)都能發(fā)現(xiàn),這些養(yǎng)殖場(chǎng)也并沒(méi)有因感染覆滅。它是被稱為慢性潛伏性支氣管肺炎EP(又叫地方性肺炎)的主要致病因子。它長(zhǎng)期定植在氣管纖毛的上皮細(xì)胞,抑制先天性和獲得性免疫反應(yīng)。這使得上呼吸道共生細(xì)菌如多殺性巴氏桿菌、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌等在肺部增殖并加劇疾病。EP的特征是慢性、高發(fā)病率、低死亡率和降低畜體性能。EP對(duì)經(jīng)濟(jì)效益的影響比較顯著,主要表現(xiàn)在降低平均日增重、增加料肉比和延長(zhǎng)飼養(yǎng)到出欄屠宰的天數(shù)。EP主要發(fā)生在分階段飼養(yǎng)的生長(zhǎng)育肥豬中,有時(shí)也會(huì)發(fā)生在連續(xù)生產(chǎn)的保育階段。此外,當(dāng)與引起PRDC的部分病毒性病原體相互作用時(shí),豬肺炎支原體也能導(dǎo)致由特定病毒性病原體包括PRRSV、PCV感染所引起的疾病。雖然大多數(shù)豬群都是地方性感染豬肺炎支原體,但它進(jìn)入陰性群體中時(shí),又可以同時(shí)感染各個(gè)年齡段的豬只。


病原學(xué)

豬肺炎支原體最早分離在半個(gè)世紀(jì)前(Goodwin et al. 1965; Mare and Switzer 1965),并一直認(rèn)為是EP的病因。由于營(yíng)養(yǎng)需求高、生長(zhǎng)速度慢及其它細(xì)菌的污染(特別是豬鼻支原體),豬肺炎支原體在體外很難生長(zhǎng)。廣泛用于肺炎支原體培養(yǎng)的培養(yǎng)基由FRIIS(1975)開(kāi)發(fā)的,里邊含有大量抗生素、豬、馬源血清、酵母提取物、pH指示劑等化合物。最近Cook等人(2016)通過(guò)加入卡那霉素來(lái)抑制豬鼻支原體,從而優(yōu)化培養(yǎng)基(Anderson et al. 2016a)。


豬肺炎支原體比其它的支原體體外生長(zhǎng)要慢,并且難以分離。雖然一般通過(guò)培養(yǎng)方式分離豬肺炎支原體,但并不能作為常規(guī)診斷方法。最佳的培養(yǎng)樣本有典型的肺炎病變和周圍正常的肺組織、支氣管拭子。接種FRIIS肉湯培養(yǎng)基后,對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行連續(xù)稀釋,并連續(xù)監(jiān)測(cè)3-30天或更長(zhǎng)時(shí)間,讓其充分生長(zhǎng)。生長(zhǎng)情況通常通過(guò)觀察培養(yǎng)基顏色變化來(lái)判斷,也可以使用ATP光度法精確測(cè)量(Calus et al. 2010)。將培養(yǎng)液接種到固體瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行克隆,這可能需要幾天到幾周的時(shí)間,其形態(tài)最好用體視顯微鏡進(jìn)行觀察。單個(gè)的豬肺炎支原體菌落要通過(guò)PCR的方法進(jìn)行鑒定(Stakenborg et al.2006a),或者接種Friis肉湯培養(yǎng)后通過(guò)其他方法鑒定、收獲和儲(chǔ)存。


豬肺炎支原體菌株具有抗原性和遺傳多樣性。最初人們懷疑豬肺炎支原體缺乏復(fù)制能力,最并通過(guò)血清學(xué)(Ro和Ross 1983)、指紋圖譜(Kokotovic et al.1999)、臨床表現(xiàn)(Vicca et al. 2003)和體外生長(zhǎng)情況(Meyns et al. 2007)進(jìn)行驗(yàn)證。在分子水平上主要是通過(guò)測(cè)序編碼主要粘附蛋白P146的特定VNTR基因序列(Mayor et al.2007)、限制性內(nèi)切酶酶消化后的片段長(zhǎng)度(Kokotovic et al.1999); Stakenborg .2006b),或分析各種基因座中VNTR模式(Dos Santos et al.2015b; Nathues et al. 2011; Stakenborg et al.2005b; Vranckx et al.2011)來(lái)鑒定豬肺炎支原體特性。在感染豬群中,豬肺炎支原體菌株毒力會(huì)有不同,但高毒力菌株引起更嚴(yán)重的肺炎(Meyns et al. 2007; Vicca et al. 2003; Woolley et al. 2012)。高毒力菌株的高致病性主要?dú)w因于其在肺部更高的復(fù)制能力和更嚴(yán)重的炎癥誘導(dǎo)過(guò)程 (Meyns et al. 2007)。

流行病學(xué)

豬肺炎支原體引起的豬群感染幾乎遍布每個(gè)養(yǎng)豬的國(guó)家。其流行性雖然很高,但幾乎沒(méi)有公布出來(lái)的具體流行數(shù)據(jù)。瑞士例外,在完成國(guó)家層面的根除計(jì)劃后,其流行率不到1% (St?rk et al. 2007);可是還偶爾能在家豬和野豬中檢測(cè)到豬肺炎支原體(Kuhnert and Overesch 2014; Kuhnert et al. 2011)。家豬與野豬群間的交叉?zhèn)鞑ド袩o(wú)記錄。


豬肺炎支原體可以在各階段豬只鼻腔和氣管上皮定植(Goodwin 1972)。其隨被感染動(dòng)物的鼻腔分泌物排出,通常通過(guò)鼻-鼻的接觸傳播方式,在易感豬只間傳播(Calsamiglia and Pijoan 2000; Rautiainen and Wallgren 2001),但這種傳播方式效率低,速度慢。研究表明,通過(guò)連續(xù)接觸 4-6 周,1只被感染幼齡豬可以傳播給1-2 頭(Meyns et al. 2004; Roos et al. 2016; Villarreal et al. 2011)。豬肺炎支原體的定植時(shí)間很長(zhǎng),通常達(dá)7-8 個(gè)月(Pieters et al. 2009)。在此期間,豬可能會(huì)或不會(huì)表現(xiàn)出臨床肺炎癥狀,這由多種因素決定,主要包括菌株毒力、感染劑量、宿主免疫力、并發(fā)的細(xì)菌或病毒引起的感染和環(huán)境(參考“發(fā)病”章節(jié))。盡管在整個(gè)感染過(guò)程中,豬肺炎支原體的排放和濃度的一致性可能會(huì)隨著時(shí)間變化,但似乎仍對(duì)其它動(dòng)物具有傳染性。暴露于具有EP臨床癥狀豬只環(huán)境中的幼齡仔豬,感染豬支原體肺炎的比率要明顯高于暴露于具有亞臨床癥狀豬只環(huán)境中的比率(Pieters et al. 2009)。


豬群中肺炎支原體最常見(jiàn)的感染方式是通過(guò)引入被感染豬只,通過(guò)緊密的直接接觸傳給陰性豬只。但幾十年來(lái),人們一直懷疑豬肺炎支原體的空氣傳播(Goodwin 1985),并確定可以短距離傳播(Fano et al. 2005)。Otake 等人證實(shí),距離感染豬場(chǎng) 9.2 千米處的空氣中攜帶的Mhyo仍能感染已接種免疫動(dòng)物。對(duì)丹麥無(wú)特定病原體(SPF)系統(tǒng)的大量研究發(fā)現(xiàn),畜群的再次感染通常發(fā)生在有利于氣溶膠傳播的秋季和冬季(Jorsal and Thomsen 1988)。目前通過(guò)胎盤垂直傳播的情況尚不清楚,而通過(guò)運(yùn)輸工具傳播的風(fēng)險(xiǎn)也認(rèn)為是很小。


一旦感染豬肺炎支原體,豬群就會(huì)持續(xù)受到感染。因?yàn)橐粩喔滦笕海@就會(huì)造成病原在基礎(chǔ)豬群、外購(gòu)豬和自留后備豬群間的傳播。在哺乳期間,母畜通過(guò)鼻腔分泌物將病原傳播給后代(Calsamiglia and Pijoan 2000; Fano et al. 2007; Rautiainen and Wallgren 2001)。母豬散播Mgyo的比例隨著胎次增加而降低。一項(xiàng)研究顯示,一胎母豬散播病原比例為 73%、2-4胎為 42%、6-7 胎位 50%、8-11胎下降到 6% (Calsamiglia and Pijoan 2000)。在另一項(xiàng)研究中,1-2 胎母豬所產(chǎn)仔豬斷奶時(shí)Mhyo陽(yáng)性比例為 33%,而 3 胎及以上斷奶仔豬21% (Fano et al. 2006)。母豬和仔豬的管理操作似乎是仔豬感染的風(fēng)險(xiǎn)因素。陽(yáng)性豬只比例偏高、豬群更新率偏大、產(chǎn)房過(guò)大、哺乳仔豬臥睡溫度低、較長(zhǎng)的哺乳期等都會(huì)增加斷奶時(shí)感染機(jī)率(Nathues et al. 2013a, 2013b; Pieters et al. 2014; Vangroenweghe et al. 2015)。仔豬的交叉寄養(yǎng)也可能增加斷奶時(shí)感染機(jī)率。在大多數(shù)研究中,斷奶時(shí)的感染率一般為 0-15%。


斷奶后,被感染仔豬與較大仔豬混群飼養(yǎng),這就增加了病原傳播的可能性。斷奶時(shí)仔豬病原感染率已經(jīng)被提出作為預(yù)測(cè)育肥后期豬只疾病嚴(yán)重程度的因子(Fano et al. 2007; Sibila et al. 2007b)。比如,在封閉的飼養(yǎng)環(huán)境中,以每4周 1:1 的傳播速率,在1月齡的斷奶時(shí)豬群2%的陽(yáng)性率,在斷奶后第 2、3、4、5 月時(shí),豬群陽(yáng)性率分別達(dá)到 4%、8%、16%、32%;而如果斷奶時(shí)感染率為6%,則相同時(shí)間感染率分別為 12%、24%、48%、96%。在一個(gè)連續(xù)流動(dòng)的生產(chǎn)系統(tǒng)中,通過(guò)與大日齡高感染率豬只直接接觸或間接共用養(yǎng)殖環(huán)境都會(huì)加劇病原的傳播(Giacomini et al. 2016; Vranckx et al. 2012)。在兩點(diǎn)或者三點(diǎn)生產(chǎn)系統(tǒng)中,EP 通常表現(xiàn)在育肥的中后期;然而在 一 點(diǎn)式系統(tǒng)中,最早在 8 周齡就能觀察到 EP 癥狀。通過(guò)研究農(nóng)場(chǎng)和生產(chǎn)系統(tǒng)間的差異因素,包括欄舍類型、通風(fēng)系統(tǒng)、飼養(yǎng)密度、氣候條件、系統(tǒng)類型(日齡階段分布、一、二、三 點(diǎn)式飼養(yǎng)系統(tǒng))等,發(fā)現(xiàn)其對(duì)豬群中豬肺炎支原體的動(dòng)態(tài)和嚴(yán)重性非常重要(Giacomini et al. 2016; Vranckx et al. 2012)。另外,其它病原或毒性物質(zhì)都會(huì)影響疾病的癥狀(見(jiàn)“致病機(jī)理”章)。


運(yùn)用分子生物學(xué)的方法可以更好的研究豬肺炎支原體菌株間的差異性和流行性。在養(yǎng)殖密度較低或病原流行率較低的地區(qū),通常在被感染的畜群中只能檢測(cè)到單一的豬肺炎支原體(Mayor et al. 2007; Vranckx et al. 2012);而在養(yǎng)殖密度較大地區(qū),豬群中經(jīng)??梢詸z測(cè)到多種病原(Michiels et al. 2017; Nathues et al. 2011)。一項(xiàng)研究表明,感染菌株較多的豬群在屠宰時(shí)有更嚴(yán)重的 EP 病變(Michiels et al. 2017)。


(天邦生物技術(shù))